￠ 產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

BLT DiI是一類(lèi)長(zhǎng)鏈的親脂性熒光染料，用于標(biāo)記細(xì)胞膜以及其他脂溶性生物結(jié)構(gòu)，激發(fā)后呈橙紅熒光。其在水中熒光強(qiáng)度很弱，與細(xì)胞膜結(jié)合或者與親脂性生物分子結(jié)合時(shí)，其熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng)。DiI被廣泛用于正向或逆向的，活的或固定的神經(jīng)等細(xì)胞或組織的示蹤劑或長(zhǎng)期示蹤劑，通常不會(huì)影響細(xì)胞的生存力。DiI除了最簡(jiǎn)單的細(xì)胞膜熒光標(biāo)記外，還可以用于檢測(cè)細(xì)胞的融合和粘附，檢測(cè)發(fā)育或移植過(guò)程中細(xì)胞遷移，通過(guò)FRAP檢測(cè)脂在細(xì)胞膜上的擴(kuò)散，檢測(cè)細(xì)胞毒性和標(biāo)記脂蛋白等。

￠ 產(chǎn)品基本參數(shù)：

別稱：BLT DiI，DiI(DiIC18(3))

分子量（g/mol）：~933

形態(tài)：固體粉末

純度：95+%

溶劑：DMSO/DMF/EtOH

激發(fā)波長(zhǎng)：550 nm

發(fā)射波長(zhǎng)：567 nm

￠ 保存條件：

避光干燥保存；粉末狀態(tài)： -20 °C，有效期二年。溶液狀態(tài)： -20 °C，有效期一年；

￠ 使用方法：

1. 染色液制備

（1）配置DMSO或EtOH 儲(chǔ)存液：儲(chǔ)存液用DMSO或EtOH配置濃度1～5 mM。儲(chǔ)存液分裝儲(chǔ)存在-20 ℃或-80 ℃，避免反復(fù)凍融。

（2）工作液制備：根據(jù)染色體系用合適的緩沖液（如：無(wú)血清培養(yǎng)基，PBS）稀釋儲(chǔ)存液，配制濃度為1～5 μM的工作液。最佳染色的工作液濃度與細(xì)胞系和實(shí)驗(yàn)體系有關(guān)，可多次嘗試染色實(shí)驗(yàn)優(yōu)化，且工作液現(xiàn)配現(xiàn)用。

2. 懸浮細(xì)胞染色

（1）加入適當(dāng)體積（300 μL）的染色工作液重懸細(xì)胞，染色細(xì)胞濃度可嘗試1×10⁶/mL。

（2）孵育細(xì)胞：在室溫或37 ℃環(huán)境避光孵育細(xì)胞，不同的細(xì)胞最佳培養(yǎng)時(shí)間不同。建議首次孵育細(xì)胞20 min，之后可優(yōu)化孵育時(shí)間，以得到均一的標(biāo)記結(jié)果。

（3）清洗多余染料：孵育結(jié)束，以1000～1500 rpm離心細(xì)胞5 min，去除上清液，用緩沖液重復(fù)清洗操作三次，注意緩慢操作。

3. 貼壁細(xì)胞的染色

（1）將貼壁細(xì)胞培養(yǎng)于無(wú)菌蓋玻片上。

（2）從培養(yǎng)基中移走蓋玻片，吸走過(guò)量培養(yǎng)液，將蓋玻片放在潮濕的環(huán)境中。

（3）在蓋玻片的一角加入適當(dāng)體積（300 μL）的染料工作液，輕輕晃動(dòng)使染料均勻覆蓋所有細(xì)胞。

（4）以相同懸浮細(xì)胞的孵育條件進(jìn)行孵育，及孵育時(shí)間優(yōu)化。

（5）吸干染料工作液，用培養(yǎng)液或緩沖液清洗蓋玻片3次以上。

注：本方案僅供參考，具體實(shí)驗(yàn)條件請(qǐng)研究人員依據(jù)自身項(xiàng)目進(jìn)行優(yōu)化。

附表：

￠ 注意事項(xiàng):

1．為了您的自身安全，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)做好有效防護(hù)；

2．最佳染色的工作液濃度與細(xì)胞系和實(shí)驗(yàn)體系有關(guān)，可多次嘗試染色實(shí)驗(yàn)優(yōu)化，且工作液現(xiàn)配現(xiàn)用；

3．本產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)！