產品規(guī)格
產品編號 | 規(guī)格 | 目錄價(元) |
LS001 | 100 mg | 500 |
LS002 | 500 mg | 1500 |
LS003 | 1 g | 詢價 |
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產品參數(shù)
中文別名(Chinese synonym) | (4S)-4,5-二氫-2-(6-羥基-2-苯并噻唑)-4-噻唑羧酸鉀; (S)-4,5-二氫-2-(6-羥基苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酸鉀鹽 |
英文別名(English synonym) | D-Luciferin potassium salt |
CAS號(CAS NO.) | 115144-35-9 |
分子式(Formula) | C11H7N2O3S2 K,結構式如下圖 |
分子量(Molecular weight) | 318.42 g/mol |
外觀(Appearance) | 淡黃色粉末 |
溶解性(Solubility) | 易溶于水(30 mg/mL) |
純度(Purity)(HPLC) | ≥98% |
最大激發(fā)/發(fā)射波長(nm) | Ex=328nm/ Em533nm |
產品介紹
D-熒光素(D-Luciferin)是熒光素酶(Luciferase)的常用底物,可被催化生物發(fā)光產生典型的黃綠光,普遍應用于整個生物技術領域,特別是體內活體成像技術。以ATP和Mg2+作為輔因子,有氧條件下熒光素酶與D-熒光素反應發(fā)出一種特有的黃綠色發(fā)射光。熒光素酶的表達基因被轉染在研究動物中比如大鼠、小鼠,用來標記腫瘤細胞,干細胞或傳染病。通過生物熒光成像這個模式系統(tǒng)中注射D-熒光素可以用來實時非侵入性監(jiān)測疾病的進程或藥物效率。當熒光素過量時,產生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關性,也可以基于ATP對此反應體系的影響,用來指示能量或生命體征。
保存條件
冰袋(wet ice)運輸;避光干燥保存。粉末:-20 ℃保存,2年有效;-80 ℃保存,4年有效。
產品特點
1、生物發(fā)光性能
D-熒光素鉀鹽可使熒光素酶標記基因和熒光素酶融合蛋白在活細胞、組織和生物體的表達發(fā)光成像。它的生物發(fā)光過程需要ATP和Mg2+作為輔因子,在有氧條件下與熒光素酶反應產生黃綠色發(fā)射光,而在37℃的活體內則會轉換為紅光。熒光素酶的表達基因可以被轉染到研究動物中,如大鼠、小鼠,用來標記腫瘤細胞、干細胞或傳染病。通過生物熒光成像技術,可以實時、非侵入性地監(jiān)測疾病的進程或藥物效果。
2、應用范圍廣
D-熒光素鉀鹽在整個生物技術領域都有廣泛的應用,特別是在體內活體成像技術中應用較為廣泛。熒光素酶的表達基因可以被轉染到研究動物的細胞中,用來標記腫瘤細胞、干細胞或傳染病。通過生物熒光成像技術,可以實時、非侵入性地監(jiān)測同時,D-熒光素鉀鹽還可以被用于細胞活力檢測、衛(wèi)生監(jiān)控等方面。
3、安全性高
D-熒光素鉀鹽作為一種生物探針,具有較高的安全性。它是一種天然的化合物,不會對生物體產生有害影響。在體內應用時,它能夠快速被代謝和清除,不會在體內殘留太長時間。因此,D-熒光素鉀鹽被廣泛應用于生物學研究和醫(yī)學診斷領域。
4、使用方便
D-熒光素鉀鹽能夠迅速溶于水或緩沖液中,使用方便。它不需要特殊的顯微鏡或設備,可以在常規(guī)的熒光檢測設備上進行測量。同時,它還具有高選擇性,能夠快速、準確地檢測ATP酶的活性,同時不會被其他酶類干擾。因此,D-熒光素鉀鹽在生物學研究中應用非常廣泛。
使用方法
1. 體外生物發(fā)光檢測
1)用無菌蒸餾水溶解D-熒光素鉀鹽,建議配制成15 mg/mL的儲存液。立即使用或分裝,-20℃避光保存,避免反復凍融(注:配成溶液的D-熒光素鉀鹽儲存時間不宜過長);
2)用預熱好的組織培養(yǎng)基將儲存液稀釋至適當?shù)墓ぷ饕簼舛?,如?.15 mg/mL;
3)去除原培養(yǎng)基,替換加有D-熒光素鉀鹽的培養(yǎng)基,37℃孵育5-10 min;
4)然后進行圖像分析。
2. 活體成像分析
1)用無菌的DPBS (不含Mg2+、Ca2+) 溶解D-熒光素鉀鹽,建議配制成15 mg/mL的熒光素的注射液,混勻;
2)用0.2 μm濾膜過濾除菌,立即使用或分裝,于-20℃避光保存,避免反復凍融(注:配成溶液的D-熒光素鉀鹽儲存時間不宜過長);
3)建議按照150 mg/kg的熒光素用量/體重進行注射相應的量,如果你要注射熒光素時動物依舊是清醒的,腹腔(IP)或皮下(SQ)注射需等待三分鐘后根據(jù)您的方法選擇(氣體或注射麻醉)使其鎮(zhèn)靜,而靜脈注射(IV)則需立即對動物進行鎮(zhèn)靜;
4)為建立熒光素酶表達的動力學曲線,對于腹腔或皮下注射方法:每隔5-10分鐘拍攝一次成像時間可達40-60 分鐘,對于靜脈注射方法:每1-5分鐘拍攝一次可達20-30分鐘;
5)對于您的動物模型從動力學曲線中選擇最佳的成像時間點,大部分動物模型對于腹腔注射或皮下注射熒光素注入動物體內后大約10-15分鐘達到信號峰值,對于靜脈注射熒光素沒注入后2-5分鐘達到峰值;
6)實驗時選擇光信號達到最強穩(wěn)定平臺期進行成像分析。
注:建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學曲線,從而確定最高信號檢測時間和信號平臺期。
3.植物活體成像分析(以煙草為例)
1)用無菌的DPBS (不含Mg2+、Ca2+) 溶解D-熒光素鉀鹽,建議配制成15 mg/mL的熒光素的注射液,混勻;
2)用0.2 μm濾膜過濾除菌,立即使用或分裝,于-20 ℃避光保存,避免反復凍融(注:配成溶液的D-熒光素鉀鹽儲存時間不宜過長);
3)建議在實驗使用前將15 mg/mL的儲存液稀釋50倍配制成0.3 mg/mL的工作溶液待用。
4)將帶有熒光素酶報告基因的菌液注射處理完成后繼續(xù)培養(yǎng)36-48 h左右,然后用1 mL注射器吸取0.3mg/ml 的D-熒光素鉀鹽注射于煙草葉背面,或者用0.3mg/ml 的D-熒光素鉀鹽直接噴灑在煙草葉片背后,黑暗條件下靜置5 min。最后剪取煙草葉片到活體成像儀中,用 bioluminescence 程序進行成像,根據(jù)實驗結果調整曝光強度并拍照。
注:實際使用的D-熒光素鉀鹽最佳工作濃度需根據(jù)實驗具體情況而定,或通過預實驗進行摸索和優(yōu)化。
溫馨提示
1.為了您的自身安全,實驗前請做好有效防護;
2.本品要進行避光操作和保存,配成溶液過濾除菌后可分裝于-20℃或-80℃凍存,配成溶液的D-熒光素鉀鹽儲存時間不宜過長;
3.本產品僅供科研使用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內!
應用案例
