相對于傳統(tǒng)的手工灌膠,預制膠可以避免接觸大量有毒試劑,節(jié)約大量時間,有效解決手工灌膠差異大等問題。
免染預制膠不僅擁有普通預制膠的快速穩(wěn)定優(yōu)點,同時采用了免染成像技術,只需短時間的紫外光激活即可對蛋白觀察,避開繁瑣耗時的染色流程,過程中不會產生特殊氣味,與下游實驗兼容,輕松實現(xiàn)電泳和轉膜過程中各個環(huán)節(jié)的蛋白直接可視化。
博鷺騰提供的蛋白預制膠提供不同濃度的梯度膠和固定濃度膠。梯度濃度包括(4-20%,4-12%與8-16%),固定濃度膠包括(6%、7.5%、10%、12.5%與15%)點樣孔數(shù)分別為10孔和15孔。其采用獨特的凝膠制備工藝制備而成,電泳效果極佳,兼容市面上各種電泳槽,具有適應性廣、分辨率高、穩(wěn)定性高、條帶清晰均勻等優(yōu)點。
博鷺騰免染預制膠優(yōu)勢:
更便捷 現(xiàn)開現(xiàn)用,撕掉膠板底部膠帶即可使用,不用再自行配制配膠所需溶液、灌膠、等膠凝固,安全省事便捷
適用范圍更廣 梯度凝膠可以同時分離較大范圍分子量的蛋白質
條帶清晰 邊緣效應弱,條帶更平直,電泳 效果更好
更高效 只需紫外激發(fā)即可觀察蛋白
更靈敏 與考馬斯染料相比靈敏度和動態(tài)范圍更好
更準確 免染成像后可以配合我們的儀器對樣品進行總蛋白均一化,更好更準確地進行蛋白質的定量計算,有效解決管家蛋白作為樣品
內參存在的問題
更省心 凝膠質量穩(wěn)定避免手工灌膠的差異性,實驗結果重復性更好
使用操作:
將預制膠從包裝袋取出,撕開底部藍色膠帶;
將預制膠固定在電泳槽中,向內槽加滿電泳液,外槽的電泳液加到稍低于內槽不會漫過膠板即可;
緊接著平穩(wěn)、緩慢地拔出梳子,注意孔道內無氣泡后即可開始上樣;
將專用的上樣槍頭或 10 μL 槍頭沿垂直方向輕輕插入上樣孔中進行上樣;
將電泳槽蓋子蓋好,并將電源線插頭插入電泳儀電源插孔(紅對紅,黑對黑)。推薦使用先低壓 80V 電泳 20 分鐘,然后換高壓 120 V 電泳約 50-75 分鐘,直至溴酚藍條帶電泳至凝膠近底部或實驗預定的位置;
取出膠板,用小撬板沿兩板間側邊的縫隙將兩板別開,掰開兩個板取出凝膠;
將凝膠浸泡于緩沖液中,置放在免染成像儀上,使用紫外光激發(fā)(發(fā)光的激發(fā)波長為345-356nm,發(fā)射波長為500nm)2-5 min 后即可觀察和拍照記錄樣品電泳情況。

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