| 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 售價 |
| NLuc熒光素酶檢測試劑盒Nano Luciferase Reporter Gene Assay Kit | NLK001 | 100T | ￥880.00 |
| NLuc熒光素酶檢測試劑盒Nano Luciferase Reporter Gene Assay Kit | NLK002 | 500T | ￥2,880.00 |
n 產(chǎn)品簡介
NLuc熒光素酶是一種經(jīng)基因工程改造的小分子酶（19.1kDa），是性能卓越的生物發(fā)光報告基因蛋白。 它比螢火蟲（Photinus pyralis）或海腎熒光素酶亮約 150 倍，使用一種新型的腔腸素類似物（Furimazine） 可產(chǎn)生高強度、輝光型發(fā)光信號。該發(fā)光反應(yīng)不依賴 ATP，同時通過抑制本底發(fā)光信號而獲得最高的檢測靈敏度。
NLuc Reporter Gene Assay Kit提供了一種簡單的、可單次添加的試劑，具有靈敏度高的特點，它可在 NLuc螢光素酶存在的情況下產(chǎn)生較強信號。
n 產(chǎn)品規(guī)格
組分編號 | 組分名稱 | 產(chǎn)品編號/規(guī)格 |
NLK001 | NLK002 | NLK003 |
NLK001/NLK002/NLK003-A | NLuc檢測緩沖液 | 10 mL | 50 mL | 1 mL |
NLK001/NLK002/NLK003-B | NLuc檢測底物（50×） | 200 μL | 1 mL | 20 μL |
n 保存條件
-20℃保存，有效期一年。NLuc檢測底物（50×）建議分裝-80℃保存。
? 操作流程
1.自備材料
PBS；多道排槍；白色不透光/黑色細胞培養(yǎng)板；化學(xué)發(fā)光儀或酶標儀。
2.檢測前準備
1）預(yù)先將NLuc檢測底物（50×）和NLuc檢測底物緩沖液放置于室溫。
2）根據(jù)實際使用量，以1:50的比例將適量的NLuc檢測底物（50×）與NLuc檢測底物緩沖液混勻，室溫避光備用。例如：如果需要10 mL反應(yīng)液，則需要加入0.2 mL的檢測底物。
注：建議現(xiàn)配現(xiàn)用，剩余的含有新型底物的反應(yīng)液在當次實驗結(jié)束后不建議留存。
3.操作方法
1）從細胞培養(yǎng)箱中取出細胞培養(yǎng)板，放置5-15 min，恢復(fù)至室溫。
注：使用白色不透光或者黑色的細胞培養(yǎng)板，減少孔間的信號干擾。
2）加入檢測溶液
使用多道排槍向每個細胞孔中加入平衡至室溫的含有底物的反應(yīng)液，加樣體積與細胞培養(yǎng)液體積相同并混勻。例如，96孔板通常加入80-100μL
培養(yǎng)液，相應(yīng)加入80μL-100μL檢測溶液；384孔板通常加入20-30μL 培養(yǎng)液，相應(yīng)加入20-30μL檢測溶液。
3）發(fā)光檢測
混勻后于化學(xué)發(fā)光儀或酶標儀中檢測NLuc熒光素酶報告基因活性。
注：為得到最佳檢測結(jié)果，請在加入檢測試劑后1小時內(nèi)完成檢測。
4.分析數(shù)據(jù)
（1）實驗設(shè)計：根據(jù)不同實驗?zāi)康?，在每個培養(yǎng)板中都應(yīng)設(shè)置對照組、實驗組和空白對照組。為了保證實驗準確性，理論上每個實驗組（包括對照組）都應(yīng)當減去空白對照組的螢火蟲螢光素酶的發(fā)光測量值。
①空白對照組：
背景F：未轉(zhuǎn)染細胞+反應(yīng)液。
注：空白對照組的樣品量必須與實驗樣品量相同，包含與實驗樣品相同的培養(yǎng)基/血清組合，并加上完全相同的檢測試劑。
②實驗組：轉(zhuǎn)染細胞經(jīng)實驗化合物處理（即實驗組F）。
③對照組：轉(zhuǎn)染細胞不經(jīng)處理，用以標準化結(jié)果（即對照組F）。
（2）計算結(jié)果：
實驗組=實驗組F-背景F。
對照組=對照組F-背景F。
表達倍數(shù)=實驗組/對照組。
? 注意事項
1. 酶促反應(yīng)對溫度較為敏感，加樣檢測前務(wù)必將所有試劑平衡至室溫（20-25 ℃）再使用；
2. 檢測時需使用白色或黑色的96孔板。如果使用普通透明的96孔板，相鄰孔之間會產(chǎn)生相互干擾；
3. 檢測儀器：能檢測化學(xué)發(fā)光的儀器都適用，但由于不同儀器的設(shè)置和靈敏度不同，測得的光信號值也會不同；
4. 單管熒光測定儀測定，每個樣品與測定試劑混合后到測定前的時間應(yīng)保持一致；
5. 為了您的自身安全，實驗前請做好有效防護；
6. 本產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
實驗數(shù)據(jù)：
*在不同培養(yǎng)基中檢測的信號均達到和知名品牌同等水平甚至更高
*本試劑盒信號衰減程度和知名品牌一致
